很多初接触色谱领域的朋友对制备色谱这个名词比较陌生。其实,在化学化工等广泛采用的层析法以及薄层色谱就是为典型的制备色谱,换句---,将分析色谱的进样量增大,---制备色谱系统哪个牌子好,同时得出大量的所需物质(馏分)的过程就可以称为制备色谱。分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。而制备色谱系统则是利用制备色谱的思想---能得到纯化物质的多个分析测试设备联用的总称。概述图便是一套典型的制备色谱系统。
色谱柱化学(化学性质)变化:一般会在色谱柱使用数周或数月内逐渐变化。柱老化一般伴随着柱背压的上升、保留时间的逐渐变化(漂移)(更长或更短)以及更多的峰拖尾。更换新柱以确定是否是柱老化导致的保留时间变动。
色谱柱温度变化:柱温变化会导致保留时间的变化,每1℃的温度变化会引起1-3%的保留时间变化。如果不使用柱温箱(即“室温”条件),---制备色谱系统,实验室温度通常会变化。尤其是当供暖或空调通风口直接吹向系统时,---制备色谱系统报价,温度变化---明显。使用柱温箱可以避免色谱柱出现这样的温度问题,且hplc系统应远离通风口放置。
问:tfa在缓冲液中是不是只起到调节ph的作用呢?tfa的浓度越高基线的漂移越厉害,那是不是说它的浓度在缓冲液ph允许的情况下越低越好呢?
答:(1)tfa起到类似离子对的作用,一般浓度在0.05-0.1%,过高的浓度,会使溶液偏酸,长时间使用可能影响柱子寿命。
(2)同时tfa可以抑制硅胶表面硅醇基,---碱性化合物的峰型。有时0.1%tfa分离不好的话。可以考虑加大浓度到0.2%。但要注意用完后及时冲洗色谱柱。
(3)走梯度时,因为走成基线漂移,但对制备的影响不大。
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