气相色谱(gas chromatography 简称gc)是分离和鉴定低分子量气体或挥发性液体的理想技术,它在工业、农业、、建设、科学研究中都得到了广泛应用。气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。---液相色谱法的原理与气相色谱法的原理相同。但是气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,高压制备色谱系统价格,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的---,有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,高压制备色谱系统,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。这使气相色谱法的使用范围受到了---。
制备色谱是以分离出纯物质为目的的色谱系统,分析色谱是以分析出样品组分信息为目的的色谱系统,基于他们目的的不同,制备色谱相对于分析色谱有很多不同特征,不能简单等同。
当我们在实验室中想得到纳克乃至毫克级的纯物质时,稍微改装下分析型色谱系统就能简单轻松的完成,不过,若所需制备的纯品量很大,此时,再用分析型色谱系统分离纯化,可以预见这将是一场“灾难”。
制备色谱常用的色谱模式有低压,中压,高压三种,以应对不同类型和不同纯度要求的样品的分离,同时尽可能减少成本。
制备色谱柱为zorbaxsb-c18 9.4*250mm及gilson馏分收集器,色谱仪为agilent1100或lc-6a。想用其制备面积归一化法含量为0.05%左右的杂质,初步提纯后用高分辨的lc-ms进行定性分析。如何设定色谱条件,如,流量、进样量、样品的浓度、切割点的设置、是否要浓缩,高压制备色谱系统多少钱,要求将95%以上的主峰切除。
(主峰后有二个杂质靠得很近。)
答:
1.制备用的流动相尽量等级高一点,否则流动相中的杂质会影响lc-ms分析。
2.使用馏分收集器时,---体积一定要计算准确,检测器的响应时间设到很小,否则都会影响收集的纯度和回收率。制备柱的流速一般与直径的平方成正比,高压制备色谱系统费用,如果4.6mm分析柱流速为1ml/min,9.4mm制备柱用1*(9.4/4.6)2,大约为4ml/min。进样量设到几个mg应该基本没有过载。进样样品浓度越高越好。假如进样10mg,理论计算0.05%的杂质大约只有5μg,显然浓度太低,尽量是多做几次,合并馏分然后浓缩后做lc-ms分析。
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