液相色谱-液相色谱方法----通恒(商家)

hplc的动力系统：泵

泵是hplc的动力系统。气相色谱的动力，---液相色谱便宜，实际上是钢瓶中气体的压力。而液体，它只有通过泵的转动而使之流动。

我们做一个类比：---类比成流动相，---类比成泵。血管类比成各不锈钢管。那么，---在---作为动力系统，流经着身体的各个系统。如果---跳得快点，那么血流量加大，那么血压升高。同样，泵流速提高，---液相色谱，流动相流量增大，那么色谱系统压力增大；如果血管被---半堵了，那么同样的心跳速度，压力也会增大。同样道理，如果色谱系统被污染，那么污染物堵在色谱柱头，或者各连接口等，那么泵同样的流速，---液相色谱，就有可能压力变大。---液相色谱主要出问题的就是压力莫名地增大，一般认为是色谱系统被污染而堵，解决的方法就是查看各个部件，或者清洗流路等。

---液相色谱法实验结果分析

现代色谱分析法是有效而快速的分离、分析手段，既可用于定性分析，又可用于定量分析。---液相色谱法与气相色谱法的定性分析和定量分析方法（包括测定方式和计算方法）相同。在定性分析中，有用纯物质对照的色谱鉴定法，---液相色谱方法，还有收集馏分与化学方法或其他仪器分析方法联用的非色谱鉴定法；在定量分析中，可以用峰高或峰面积以内标法、外标法或归一化法定量，并与微机联用作为现代化的分析工具。

定性分析

色谱分析法定性分析的目的就是确定每个色谱峰代表什么组分，从而确定由这些组分所构成的混合物试样的组成。常用的主要定性方法有色谱鉴定法和非色谱鉴定法两种。

1．色谱鉴定法定性

色谱鉴定法就是用纯物质对照定性，这是气相和---液相色谱法中常用的方便的一种定性方法，可以和定量测定操作同时进行。

(1)利用保留值定性

在色谱条件一定的情况下（包括柱长、柱内径、固定相、柱温、流动相及流速等），每一种物质都有其一定的保留值（包括保留时间、保留体积、调整保留时间、调整保留体积等），一般不受其他组分的影响，可以作为定性的根据。此法又称为纯物质对照定性。

在相同的色谱条件下，先测定未知物中每个色谱峰的保留时间或保留距离，再将要测的某纯物质注入色谱仪，对照比较两者的保留值，如果两者的保留值相同，就可判定该未知物与已知纯物质是同一种物质。

(2)利用加入纯物质增加峰高法定性

在稳定的色谱条件下，为了区分两个保留值（保留时间或保留距离）非常接近的组分，可以将某纯物质直接加入到试样中，再注入色谱仪，如果某组分峰的峰高增加了，表明这个色谱峰就是加入的纯物质。此法又称为纯物质追加法定性。

色谱鉴定法定性需要有纯物质对照，在没有纯物质时，可以用非色谱鉴定法定性。