现代色谱分析法是有效而快速的分离、分析手段,---液相色谱价格,既可用于定性分析,又可用于定量分析。---液相色谱法与气相色谱法的定性分析和定量分析方法(包括测定方式和计算方法)相同。在定性分析中,有用纯物质对照的色谱鉴定法,还有收集馏分与化学方法或其他仪器分析方法联用的非色谱鉴定法;在定量分析中,可以用峰高或峰面积以内标法、外标法或归一化法定量,并与微机联用作为现代化的分析工具。
定性分析
色谱分析法定性分析的目的就是确定每个色谱峰代表什么组分,从而确定由这些组分所构成的混合物试样的组成。常用的主要定性方法有色谱鉴定法和非色谱鉴定法两种。
1.色谱鉴定法定性
色谱鉴定法就是用纯物质对照定性,---液相色谱便宜,这是气相和---液相色谱法中常用的方便的一种定性方法,可以和定量测定操作同时进行。
(1)利用保留值定性
在色谱条件一定的情况下(包括柱长、柱内径、固定相、柱温、流动相及流速等),每一种物质都有其一定的保留值(包括保留时间、保留体积、调整保留时间、调整保留体积等),一般不受其他组分的影响,可以作为定性的根据。此法又称为纯物质对照定性。
在相同的色谱条件下,先测定未知物中每个色谱峰的保留时间或保留距离,---液相色谱效果好,再将要测的某纯物质注入色谱仪,对照比较两者的保留值,如果两者的保留值相同,就可判定该未知物与已知纯物质是同一种物质。
(2)利用加入纯物质增加峰高法定性
在稳定的色谱条件下,为了区分两个保留值(保留时间或保留距离)非常接近的组分,可以将某纯物质直接加入到试样中,再注入色谱仪,---液相色谱,如果某组分峰的峰高增加了,表明这个色谱峰就是加入的纯物质。此法又称为纯物质追加法定性。
色谱鉴定法定性需要有纯物质对照,在没有纯物质时,可以用非色谱鉴定法定性。
流动相就比如人体的---,其直接影响到整个系统的正常运行与否。
© 应该使用hplc级的溶剂,不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!
© 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收,从而影响---的稳定性、干扰对所分析物质的检测。
© hplc所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时,必须把使用水的管路用有机的溶剂置换,防止长霉。
© 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。
© 当有流路堵塞时,可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命,并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(ph 4 至7) 中尤其如此。
(1)柱的温度波动。即使是微小的温度变化也会导致基线波动。通常影响差异检测器、电导检测器、uv检测器或其它光电类检测器的较低灵敏度。
(2)---色谱流动相不均匀流动相条件变化,引起的基线漂移大于温度变化引起的基线漂移。
(3)污染或气体循环池
(4)探测器出口堵塞。(高压导致循环水池窗口的爆裂,产生噪声基线)
(5)不正确的流量比或流量变化
(6)柱的平衡是缓慢的,---是当移动相发生变化时。
(7)由低的溶剂污染、变质或制备。
(8)个样品具有较强的保留力(高k‘值)至汕头峰
(9)洗脱样品,显示基线逐渐增加。回收溶剂不使用,不推广.. 探测器未调整..
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