反相色谱分离纯化后，怎样除去流动相产品中的tfa和---或其他杂质？

tfa是反相色谱分离中常用的添加剂。可以用冻干的办法去除，国外许多文献是这样---的。还可以试试离子交换、凝胶层析、甚至透析和超滤，其中，离子交换层析效果比较好，还可以起到浓缩样品的作用。

首先，冻干的办法应该可以几乎完全地除去tfa和---，---实验前尽量先检测一下冻干品中的残留量，只要不超过允许范围，这种办法是很简单、有效的。

其次，如果你的---的分装量不大的话(<100ug)，建议你用离子交换层析，尽量装一个小一点儿的柱子，让含盐洗脱峰的蛋白浓度达10mg/ml以上，稀释后完全符合试验要求。如果用分子筛，考虑稀释，尽量也先过一个离子交换。此外可以试试疏水层析。如果产品是碱的话，可能会形成tfa盐，这样通过上述方法就无法除去。一般可以用碱水洗，然后将产品萃取出来。或者在里面加入一定量的---，再干燥后形成---盐。

工业制备色谱

制备纯化效率：对整个色谱制备纯化工艺的评价，尤其是成本方面的考量。

纯度、收率都是有定量的数值决定，而制备纯化效率则是个复杂的评价过程，这个过程主要是对成本（物料成本、时间成本、人力成本）、安全性、一致性等多个方面考量。分离纯化工艺中的进样量、纯化时间、纯化重现性（一致性）、安全性等等都是实际生产过程中各企业需要考虑到的方面，尤其是成规模的企业对制备效率（成本、一致性、安全性）的控制---看重。

薄层色谱（tlc）

薄层色谱，又称为薄层层析，以合适的溶剂作为流动相，以涂布在支持板上的支持物作为固定相。分离的原理是吸附。一个或多个样品涂在有薄层板上。如下图所示，该板部分浸入展开剂中，溶剂沿着吸附剂移动。样品组分随展开剂以不同的速率移动，这取决于它们对吸附剂的亲和力，从而实现组分分离。薄层色谱与纸色谱类似，可用于分析任何类型的样品，但通常用于分析植物提取物、碳水化合物、蛋白质、---等。